Practica 6

Practica Nº 6

ELABORACIÓN DE MEDIOS DE CULTIVO PARA SEMBRADO MICROBIOLÓGICO

Objetivo General.-

Aprender a elaborar correctamente medios de cultivo dependiendo del medio que se vaya

a utilizar.

Objetivos Particulares.-

1.- Establecer las medidas de seguridad para elaborar un medio de cultivo

2.- Conocer las cantidades de medio que se utiliza según lo que se vaya a utilizar

3.- Conocer que medio se utiliza para reconocer cada tipo de bacteria

INTRODUCCION

Un medio de cultivo es un sustrato o solución de nutrientes en los que crecen y se

multiplican los microorganismos.

Los medios de cultivo son necesarios para cultivar a los microorganismos en el

laboratorio y realizar procedimientos especializados como identificación de distintos

microorganismos como lo son las bacterias, análisis de agua y aislamiento de

microorganismos particulares.

Existen diferentes medios para lograr estos análisis y otros.

Composición de un medio de cultivo:

Agar.

El agar es un agente solidificado porque una vez que se funde con agua.

Polímero sulfatado compuesto principalmente de D galactosa, 3-6 anhidrido L,

galactosa y acido D. Que es un polisacárido y que se obtiene de ciertas algas marinas.

El agar es un buen agente solidificarte porque no se funde con agua hirviendo, puede

enfriarse hasta una temperatura de 40º C sin endurecerse.

Peptonas.

Son mezclas complejas de compuestos orgánicos nitrogenados y sales minerales que

se obtienen por digestión enzimático o químico de proteína animales o vegetales. Las

peptonas son muy ricas en péptido y aminoácidos pero pueden ser diferentes en

determinadas vitaminas y sales.

Extractos.

Para su preparación ciertos órganos o tejidos son extraídos con agua y alcohol y

posteriormente concentrados hasta la forma final de pasto o polvo.

Fluidos corporales.

Sangre completa, sangre desfibrinada, plasma o suero sanguíneo son frecuentemente

añadidos a los medios empleados para el cultivo de algunos patógenos. La sangre no

puede ser esterilizada y debe por tanto, ser obtenida en condiciones asépticas

directamente de un animal sano.

Sistemas amortiguadores.

Algunos componentes son incorporados a los medios de cultivo para mantener y sales

como fosfato disódico o dipotásico o sustancias como las peptonas previenen una

desviación del pH.

Indicadores de pH.

Los indicadores de pH son incorporados en algunos medios de cultivo y dan evidencia

visual de los cambios de pH que ocurren.

Agentes reductores.

Cisterinas, tioglicolato y otros que se añaden a los medios de cultivo para crear

condiciones que permitan el desarrollo de los gérmenes microaerófilos y anaerobios.

Agentes selectivos.

La adición de determinadas sustancias al medio de cultivo puede convertirlo en

selectivo, a la concentración adecuada actúan como medios selectivos frente a

determinados microorganismos.

Material:

 1 paquete de cajas de Petri sin división

 1 paquete de cajas de Petri con 2 divisiones

 1 paquete de cajas de Petri con 3 divisiones

 Medios de cultivo

 Mechero

 Autoclave

 Balanza granataria

 1 franela

 Encendedor o cerrillos

 Agar

 Algodón

 Papel destraza

 Bata de laboratorio

 Gasas

 Tijeras

PROCEDIMIENTO:

1. Preparar el número de cajas que se le indique para cada medio de cultivo.

2. Consultar el manual de medios de cultivo o el instructivo que viene en el reverso del

frasco de cada medio de cultivo.

3. Los medios de cultivo a preparar son los siguientes:

Agar sal y manitol o agar 110

Eosina y azul de metileno.

Agar soya tripticaseina.

Agar de Mar Conkey.

Agar Mueller Hinton.

Agar salmonella sigella

Agar verde brillante

Agar biggy

RUTA DE TRABAJO:

RESULTADOS:

Realizar los dibujos, procedimiento, composición y cálculos realizados de cada uno de los

medios elaborados:

Agar sal y manitol o agar 110

Eosina y azul de metileno.

Agar soya tripticaseina.

Agar de Mar Conkey.

Agar Mueller Hinton.

Agar salmonella sigella

Agar verde brillante

Agar biggy

DISCUSIÓN.

CONCLUSIÓN.

BIBLIOGRAFÍAS.

CUESTIONARIO