Practica 8

Practica No. 8

SELECCIÓN DE COLONIAS Y MORFOLOGÍA COLONIAL DE MICROORGANISMOS

Objetivo general

Que el alumno aprenda a describir la morfología colonial bacteriana.

Objetivos específicos.

1.- Identificar cada tipo de elevación de la colonia que se presente

2.- Identificar la morfología sin que el medio de cultivo se contamine

3.- Conocer la morfología de bacterias mas comunes

Introducción.

Una de las características principales de las bacterias es su apariencia (características de su

desarrollo) seguida del crecimiento en los diferentes medios de cultivo.

Los microorganismos que crecen sobre la superficie solida, tienden a formar agrupaciones

que se denominan colonias, las colonias suelen ser de características constantes para el

medio de cultivo usado, la temperatura de incubación y el microorganismo del que se trate,

por lo que su estudio es de gran utilidad tanto en la clasificación como en la identificación.

Una colonia microbiana está constituida por individuos de la misma especie provenientes de

una célula y de un grupo de ellas, llamadas Unidades Formadoras de Colonias (UFC).

Las colonias aisladas se pueden subcultivar individualmente transfiriéndolas a otros medios

de cultivo a fin de obtener cultivos puros y pueden ser estudiadas en medios diferenciales. Y

la evaluación de las características macroscópicas de las colonias se lleva a cabo

usualmente mediante el examen visual del desarrollo en la superficie de las placas de agar.

La inspección de los cultivos se lleva a cabo sosteniendo la placa con una mano y

observando la superficie del agar para comprobar la presencia del desarrollo bacteriano. Las

placas de cultivo comunes tienen 100 mm de diámetro y son adecuadas y pueden

sostenerse en una mano. Se debe estudiar con cuidado a cada placa debido a que las

bacterias aisladas inicialmente a partir de la muestra, constituyen a menudo cultivos mixtos y

pueden haber una gran variedad de tipos de colonias.

La evaluación macroscópica de las colonias se lleva acabo usualmente mediante el examen

visual del desarrollo en la superficie de las placas de agar.

Los tubos que contienen los medios primarios no se utilizan comúnmente para evaluar la

morfología colonial pero una excepción a esto es el tubo rotatorio con estría utilizado por el

laboratorio, este sistema sirve para el estudio de anaerobios ya que la evaluación de la

morfología de las colonias se puede efectuar directamente a través del vidrio de los tubos sin

exponer los organismos al aire durante el examen.

La interpretación de cultivos primarios es una habilidad que se debe adquirir trabajando con

un microbiólogo, bien capacitado y generalmente se logra dominar solo luego de muchos

años de experiencia, la inspección de los cultivos se lleva acabo sosteniendo la placa con

una mano y observando la superficie de agar puro comprobar el desarrollo bacteriano.

Las características consideradas para la descripción de la morfología colonial de las

bacterias se describen a continuación:

Términos utilizados en la caracterización colonial

Tamaño: Diámetro en mm.

Forma: Puntiforme, circular, filamentosa, irregular, rizoide, fusiforme.

Elevación: Plana, elevada, convexa, pulvinada, embonada, umbilicada.

Borde o Margen: Entero, ondulado, lobulado, erosionado o lacerado, filamentoso, rizado.

Color: Blanco, amarillo, negro, marrón, anaranjado, beige, otros.

Superficie: Lisa, rugosa o granular, brillante, opaca.

Densidad: Opaca, translucida, transparente, etc.

Consistencia:

 Suave: Butirosa (mantequillosa, grasosa), mucoide o membranosa,

 Dura: Quebradiza o friable( que se rompe con facilidad), seca

NOTA: Esta característica se determina tocando la colonia con el asa de siembra o aguja de inocular

por lo tanto debe ser la última en describirse.

Luz reflejada: Brillante o mate (que no brilla).

Luz transmitida: Translucida (Transparente) u opaca.

Material.

Bata

Guantes

Cubre bocas

Asa bacteriológica

Mechero

Cinta testigo

Procedimiento.

1.- Preparar los siguientes medios de cultivo (EMB, Sal y Manitol) de acuerdo al

procedimiento visto en la práctica No 4.

2.-Dejar solidificar los medios y se envuelve en papel estraza y dejar reposar unos días,

antes someterlos a prueba de esterilidad..

3.-Sembrar en la caja que contengan el medio de cultivo EMB se hace por estría

cruzada.

4.-Sembrar en la caja con medio de Sal y Manitol, por estría cruzada.

5.-Se incuban de 24 – 48 horas.

6.-Identificar las colonias y describir de acuerdo a las siguientes características:

Tamaño, forma, color, superficie, aspecto, consistencia, elevación, margen, luz traslucida

y luz reflejada. Anotar sus observaciones.

SEGUNDA PARTE:

Trabajo a desarrollar:

Examinar los diferentes cultivos proporcionados, utilizando los diagramas que acompañan a

esta práctica, mencionando las características correspondientes de cada cultivo bacteriano.

Morfología colonial:

Describir las colonias aisladas en cada medio de cultivo, indicando las características

de la morfología colonial antes descritas.

En su cuaderno de reportes de laboratorio, en la sección de resultados hacer y llenar

la tabla que muestra a continuación:

CARACTERISTICAS	COLONIA 1	COLONIA 2	COLONIA 3
MICROORGANISMO
MEDIO DE CULTIVO
TAMAÑO (mm)
FORMA
ELEVACION
BORDE O MARGEN
DENSIDAD
COLOR
SUPERFICIE
ASPECTO
LUZ REFLEJADA
LUZ TRANSMITIDA
CONSISTENCIA

Si identifican otras características diferentes a las que se mencionaron antes,

anotarlas en la tabla.

INDICACIONES:

La inspección de cultivos se llevan a cabo sosteniendo la placa con una mano y

observando la superficie del agar para comprobar la presencia del desarrollo

bacteriano. Se deben estudiar con cuidado cada una de las placas, debido a que las

bacterias aisladas inicialmente a partir de muestras, constituyen a menudo cultivos

mixtos y puede haber una variedad de diferentes tipos de colonias.

Las colonias puntiformes pueden pasar inadvertidas entre las de mayor tamaño. Se

debe inclinar la placa en distintas direcciones con iluminación brillante directa. Se

pueden ayudar con una lupa de mano de gran aumento, para detectar colonias

pequeñas, el asa de siembra y la aguja de inoculación nos ayuda a conocer la

consistencia de las colonias. Siempre reporte el medio de cultivo y el tiempo de

incubación.

Ruta de trabajo.

Resultados.-

Dibujar la morfologia colonial del crecimiento bacteriano en los siguientes

medios:

1.-EMB

2.-Sal y Manitol

Discusión.

Conclusión.